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厭氧菌的常規(guī)培養(yǎng)技術(shù)探討

更新時(shí)間:2023-02-17      點(diǎn)擊次數(shù):1337
   厭氧菌是一類特殊的細(xì)菌,它們?cè)跊](méi)有氧氣的環(huán)境中生存和繁衍,所以又被稱作厭氧生物。厭氧菌可以在土壤、污水、沼澤以及河流等生活環(huán)境中發(fā)現(xiàn),一般情況下被認(rèn)為是有害的微生物,而在一些特殊情況下,它們可以帶來(lái)有益的影響。
  厭氧菌檢測(cè)儀利用“熒光素酶-熒光素體系”快速檢測(cè)三磷酸腺苷(ATP)。ATP拭子含有可以裂解細(xì)胞膜的試劑,能將細(xì)胞內(nèi)ATP釋放出來(lái),與試劑中含有的特異性酶發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生光,再用熒光照度計(jì)檢測(cè)發(fā)光值,微生物的數(shù)量與發(fā)光值成正比,由于所有生物活細(xì)胞中含有恒量的ATP,所以ATP含量可以清晰地表明樣品中微生物與其他生物殘余的多少,用于判斷衛(wèi)生狀況。
  厭氧菌的常規(guī)培養(yǎng)技術(shù)方法:
  厭氧手套箱是當(dāng)前臨床、科研實(shí)驗(yàn)室中合理的培養(yǎng)厭氧菌的儀器。越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)意識(shí)到提高效率和節(jié)約成本必須從厭氧罐或厭氧袋轉(zhuǎn)移到厭氧培養(yǎng)箱。它不像一次性的厭氧袋或者厭氧罐,難免會(huì)將樣品暴露在空氣中;而厭氧培養(yǎng)箱的裸手袖套設(shè)計(jì)可自由處理樣品與嚴(yán)格的無(wú)氧環(huán)境,促使更快的樣品周轉(zhuǎn),并且從材料的拆機(jī)到接種、培養(yǎng)、檢查等一系列的基本操作流程均是在厭氧環(huán)境下完成。給操作者提供了既能在箱體內(nèi)進(jìn)行操作又能單獨(dú)進(jìn)行培養(yǎng)的厭氧環(huán)境。
  厭氧培養(yǎng)箱的一般操作流程:
  1.先將樣品傳遞室外門打開,把所需樣品放進(jìn)傳遞室;關(guān)上傳遞室的同時(shí)空氣也會(huì)隨之進(jìn)入到傳遞室。通過(guò)抽真空加入氣體的自動(dòng)循環(huán)方式將傳遞室變?yōu)閰捬鯛顟B(tài)。
  2.將橡膠袖套也通過(guò)抽真空加入氣體的自動(dòng)循環(huán)方式變?yōu)閰捬醐h(huán)境。
  3.通過(guò)袖套打開密封門,把手伸入操作室內(nèi)將樣品傳遞室內(nèi)門打開,取出需樣品放到操作室進(jìn)行操作。
  4.操作臺(tái)內(nèi)部有電源插座,方便操作者用接種環(huán)為其菌落接種。
  5.把所需培養(yǎng)的培養(yǎng)皿或三角燒瓶放入操作室后背懸掛的培養(yǎng)室進(jìn)行單獨(dú)培養(yǎng);良好的溫度控制有利于菌落的生長(zhǎng)繁殖,后通過(guò)肉眼或者顯微鏡來(lái)觀察判斷厭氧菌的生長(zhǎng)情況。
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